李承辉，李瑞雪，陶  鹏，李  健，陈  俭，殷玉鹏
(广西金陵农牧集团有限公司)

      1  实验室检测的内容
      1.1  病原的检测
      目前，实验室病原的检测大致可以分为两种， 一种是像细菌分离鉴定，寄生虫镜检等可以直接检测病原微生物是否存在， 另一种是采用 PCR 的方法， 检测样品中的某种病原微生物的核酸是否存在。聚合酶链式反应(PCR) 是世界动物卫生组织认可的常规核酸检测方法之一 ^[1] ，广泛用于包括非洲猪瘟在内的实验室诊断。该检测具有简单、快速、灵敏、特异性强和对样品的纯度要求较低等 优点，还可以区分野毒和疫苗毒。常用于检测血清、血液和组织等样本中的病原。
      其中， 实时荧光定量 PCR 是病原体检测的******， 也是非洲猪瘟 ASFV 检测的金标准。实时荧光 定量 PCR 是一种通过寡核苷酸探针的荧光信号特异性识别靶序列并实时监测基因扩增的技术。事实上， 实时荧光定量 PCR(qPCR)被认为是迄今为止实现的最灵敏和最可靠的方法 ^[2]，它可以确定病毒载量，是目前各个检测实验室的最常用的检测手段。
对于某些危害较大的传染病， 如：非洲猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征(猪蓝耳病)、腹泻相关的传 染病等，在检测出相关的病原后， 还需要进行后续的分析。如非洲猪瘟病毒，需进行分型鉴定，判断是哪一种毒株感染。猪蓝耳病需要分型鉴定和测序，判断是新发还是旧发，便于进一步调整生物安全防控，查缺补漏。
      在猪场中往往细菌性疾病对猪场的影响也很大，因为细菌很容易产生耐药性。临床上，一般是根据症状和病理表现来决定使用何种抗生素， 有时候病情会随着抗生素的使用很快稳定，但是大多数时候，细菌性疾病往往都是混合感染后期出现的 ^[3] ，病情复杂，以及细菌耐药性的提高， 不能对 症下药，使细菌性疾病不能及时控制。这时候只需要进行实验室精准诊断，像细菌分离鉴定和药敏试验等，来判断是什么原因造成的，以及这些细菌对那些药比较敏感，并通过细菌分离制作自家菌苗。

      1.2  抗体检测
      抗体检测的基本原理是基于抗原-抗体的特异性结合反应， 通过检测动物体内抗体水平了解掌握抗原的免疫或感染水平。当前最常用的方法就是酶联免疫吸附测定(ELISA)。该方法操作方便，快捷，灵敏度高，适合大量样本的检测。
      1.2.1  预防疾病
      比如后备种猪的引进、隔离、驯化，种猪的交易等许多环节都要进行及时检测。
      1.2.2  分析猪群的实际健康状况
      以爱德士试剂盒检测猪蓝耳病抗体为例，猪场蓝耳病发病率高的条件有三种：仔猪群体内PRRSV 抗体的 S/P 数值大于 1.5，并且在猪群总数的占比超过 20%；母猪群体内 PRRSV 抗体的 S/P 数值大 于 2.5；并且在猪群总数的占比超过 20%；同一阶段，猪群中体内 PRRSV 抗体的 S/P 数值离散度过大。在猪群抗体检测中，出现以上三种情况之一，则需对猪群进行疫病防治 ^[4]。所以， 血清学诊断 对于某些疾病的诊断还是非常必要的。
      1.2.3  免疫程序的合理制定
      免疫程序的制定要按照所测的实际抗体水平为依据，再结合当地实际，合理制定各场的免疫程序，因为到目前为止还没有一个标准的猪场的免疫程序。特别是在使用活苗的时候，需要考虑对母源抗体的影响，比较可靠的方法就是使用血清学检测的方法来测定母源抗体的消长，进而确定免疫 接种的******时机。
      1.2.4  了解猪群的免疫状态
      免疫效果受多种因素的影响，主要有仔猪母源抗体和成年后抗体水平高低，免疫方法、次数、 时间，疫苗的种类等。首次免疫和再次免疫的时机是否合适是获得良好免疫效果的关键。仔猪母源抗体水平决定了首次免疫时间，上一次免疫猪体内的残留抗体水平决定再次免疫时间。
      1.2.5  评价疫苗效价
      疫苗的效价受多方面的影响，通过抗体检测可以了解注射疫苗后猪群是否在一定时间内产生了 抗体，阳转率如何，并以此来初步评判疫苗效果。
      建立合理的免疫监测计划，开展合理的免疫抗体监测工作，已经是猪场开展疫病综合防控的必不可少的一项措施。但也存在一些局限性， 不能区分疫苗毒和野毒感染(除伪狂犬病、猪瘟)。目前并没有针对 ASFV 的疫苗， 意味着 ASFV 抗体的存在则是表明感染， 因此， 抗体检测对于 ASFV 诊断 尤为重要。